Отправлено: 26.06.09 01:18. Заголовок: Макро, микро и супермикро… или зачем металловеду электронный микроскоп.

Макро, микро и супермикро… или зачем металловеду электронный микроскоп.

Как металловеды используют металлографический микроскоп, вы уже знаете. Об этом было здесь - http://mycoweb.narod.ru/fungi/Informe/Photographing_of_mushroom_spores.html
Как приспособить электронный микроскоп для решения своих задач?
Прежде всего, нужно выполнение нескольких обязательных условий.
Первое – Вы должны сформулировать решаемые задачи.
Второе – нужен сам микроскоп.
Третье – время и желание владельцев микроскопа тратить это самое время на Вас.

 Отправлено: 26.06.09 01:19. Заголовок: Итак, вооружаемся об..

Итак, вооружаемся объектами для исследований, десятком банок пива и едем в гости в одну замечательную организацию, которую просили нигде не называть…

Начнём с того, что у нас была возможность выбора, на каком микроскопе семейства VEGA проводить исследования.

Выбрали VEGA II XMU, кроме того, химический анализ нам был не нужен.

Следующий необходимый шаг перед откупоркой банок с пивом…?
Правильно! Пиво нужно охладить, а биологические объекты, к коим относятся споры (не электропроводные, заметим) нужно металлизовать, чтобы избежать заряда объекта и последующих негативных явлений, таких как появление белых размазанных «хвостов» на изображении, или, что значительно хуже, сдувания лёгкого объекта электронным «ветром».

Итак, холодное пиво, металлизованные объекты и электронный микроскоп…

Небольшое отступление. Электронно-микроскопические изображения сопровождены фотографиями спор, выполненными на обычном металлографическом микроскопе, и, конечно же, фотографиями самого Его Величества Гриба. В том числе и стерео.

Начнём с банальных грибов – хорошо известный всем Подосиновик красный (Leccinum aurantiacum) с гладкими спорами.

Действительно, в случае гладкой поверхности спор электронная микроскопия не даёт существенных результатов. Сравните сами оптическую фотографию и ЭМ-изображение.


Следующий объект – Дисцина щитовидная (Discina_perlata).
Перекрёстная и прямая пары.

Гладкая (почти гладкая) поверхность споры, и электронная микроскопия даёт возможность увидеть мельчайшие детали строения поверхности.

Однако мы с Вами тут же замечаем существенный недостаток электронной микроскопии – она не даёт возможности заглянуть внутрь объекта и изучить его строение.


Псевдоплектания черноватая (Pseudoplectania nigrella).
Перекрёстная и прямая пары.


Всегда задавался вопросом, что за «глазки» видны на микрофотографии сухих спор Псевдоплектании? Они, кстати, исчезают при размачивании спор.

И вот он – ответ! Это «впуклости» или «впячивания» на сферической поверхности споры, что отчётливо передаёт ЭМ-изображение.


Ивишень или Огуречный гриб (Clitopilus prunulus).

«Семечки» спор, сухие и размоченные.

На ЭМ-изображении хорошо видны белые «хвосты», вызванные перезарядкой недостаточно металлизованных объектов.

 Отправлено: 26.06.09 01:20. Заголовок: Паутинник багряный (..

Паутинник багряный (Cortinarius purpurascens).

Здесь мы видим, что и оптическая и электронная микроскопия хорошо передают характер поверхности спор этого гриба.
Однако если на оптической фотографии видно только, что поверхность спор шероховатая, то на ЭМ-изображении отчётливо видны особенности строения поверхности.
Кроме того, мы видим и ещё один недостаток электронной микроскопии – она не умеет передавать цвет!


Энтолома прекрасная (Entoloma nitidum).
Перекрёстная и прямая пары.

На микрофотографии хорошо видна характерная угловатая форма энтоломовых спор.

Что же нам показывает электронный микроскоп? Неужели это просто скомканные маленькие бумажки?


Волоконница звёздчато-споровая (Inocybe asterospora).

Не зря этот гриб получил своё имя… Сколько лучей у звёздочек-спор?

На ЭМ-изображении детали видны намного лучше, и мы можем без труда подсчитать лучи. Сколько у Вас получилось в среднем на одну спору?


Млечник жгуче-млечный (Lactarius pyrogalus).

Для млечников (Lactarius), как и для сыроежек (Russula), одним из ключевых признаков их идентификации является количество, форма и взаимное расположение шипов и гребней на поверхности спор. Только, к сожалению, наблюдать эту красоту в оптический микроскоп без иммерсионной жидкости практически не возможно.

Другое дело – микроскоп электронный с его высокой разрешающей способностью и глубиной резкости…


Другой Млечник – Млечник дубовый (Lactarius quietus).

Другой вид млечника, и совершенно иное расположение шипов и гребней на поверхности спор.


Наконец - Волнушка белая (Lactarius pubescens).

Опять шиповатые споры и их форма – идентификационный признак.

Объект был недостаточно металлизован и часть спор просто унесло электронным "ветром". Видите три тёмных пятна? Там только что были споры…

 Отправлено: 26.06.09 01:21. Заголовок: Рогатик Инвала – (Ra..

Рогатик Инвала – (Ramaria invalii).

Вытянутые (и прохожие на семечки) шиповатые споры.

"Какие красивые бяки" – сказала моя коллега по работе.


Телефора кисточковидная – (Thelephora penicillata).

Когда я первый раз нашел этот гриб и не знал ещё, как его называют, был приятно удивлён тем, что форма спор до удивления напоминает форму самого гриба.
Гриб был старый, и споры у старого гриба получились неказистые.

Однако неказистость тут же исчезла, стоило только воспользоваться электронным микроскопом.
Планета Маленького принца – решили мы!


Опять Телефора кисточковидная, на этот раз посвежее. К слову сказать, найти телефору – непростая задача. Уж очень хорошо она маскируется.


Гриб в самом расцвете сил, и споры у него фотогеничные.

Опять планета Маленького принца. Зачем ему столько?


Траметес жёстковолосисстый – (Trametes hirsuta).

Фотографируя споры этого гриба, был убеждён, что часть спор (та, которая выглядит как округлые частицы) располагается вертикально, "втыкаясь" в поверхность стекла.

Электронная микроскопия показала, что споры при падении буквально расплющиваются и намертво прилипают к стеклу.


Энцелия шелушистая – (Encoelia furfuracea).

Аналогичная ситуация со спорами энцелии. Отличие состоит только в том, что к стеклу в основном приклеиваются комки (конгломераты) спор, покрытые довольно толстым слоем слизи.

"Краковские колбаски в желе". При металлизации такого конгломерата получается малоконтрастная картинка, потому что тонким слоем золота покрывается поверхность и спор и "желе", в котором они плавают.

Попадаются и одиночные споры.

 Отправлено: 26.06.09 01:22. Заголовок: Лензитес березовый –..

Лензитес березовый – (Lenzites betulina).

Попытка получить изображение спор на базидиях закончилась блестящим подтверждением тезиса о том, что ВСЁ в грибах состоит из гиф. А что споры?.. А споры все улетели-высыпались.


Пикнопорус киноварный – (Pycnoporus_cinnabarinus).

"Гифы грибов способны тесно переплетаться, образуя ложную ткань – плектенхиму".


Напоследок – несколько историй из мира грибов и примкнувших.
Дедалеопсис трёхцветный – (Dedaleopsis_tricolor).
Перекрёстная и прямая пары.

Каким ветром в гименофор гриба занесло чешуйки с крыла бабочки? Наверное, мы это никогда не узнаем. Чешуек было много.

Но, к сожалению, почти все они были унесены "ветром" (электронным). Осталась только одна неказистая.


Неопознанная жёлтая сыроежка – (Russula sp).

Грибной клещ Пигмефорус (Pygmephorous). Зачем он здесь? Кстати, споры сыроежки ему, по-моему, как раз "по зубам".


Принимаются любые критические и конструктивные высказывания.

 Отправлено: 26.06.09 06:59. Заголовок: SAE ААААААААААААффи..

SAE
ААААААААААААффигеть!!!!!!!
ТАКОГО наверное еще никто не делал!
Слов нет! Спасибо ОГРОМНЕЙШЕЕ! Такой позитив с утра!

 Отправлено: 26.06.09 07:08. Заголовок: :sm15: :sm73: А п..

А почему не в виде статьи на сайт?

 Отправлено: 26.06.09 07:18. Заголовок: SAE Да, это должен у..

SAE Да, это должен увидеть мир! Обязательно статью на сайт!

 Отправлено: 26.06.09 07:39. Заголовок: SAE Сказать впечатля..

SAE
Сказать впечатляет - ничего не сказать. Ошеломляет и потрясает! Микологам, да и не только, при взгляде на подобные сканы спор гарантировано обильное слюноотделение.

 Отправлено: 26.06.09 08:38. Заголовок: SAE Есть к чему стр..

SAE
Есть к чему стремиться Не удивлюсь, если скоро здесь увижу грибные ДНК штрих-коды.

 Отправлено: 26.06.09 08:51. Заголовок: SAE Тут даже смайли..

SAE
Тут даже смайлики не oчень пoмoгают. Слoв нет. Огрoмнoе Вам спасибo, Андрей! Эту рабoту (и вoзмoжные ее расширения?) надo публикoвать и в виде статьи, абсoлютнo сoгласен с coloboc !
А передo мнoй - oчередная, приятная задача: Перевoдить эту штуку и oтдать друзям на чтение...

 Отправлено: 26.06.09 10:05. Заголовок: SAE Да, впечатляет. ..

SAE
Да, впечатляет. Вот что интересно: "шипы" на спорах. Это по типу репейниковых "ёжиков", чтоб лучше цепляться?
Мало того, что споры почти невесомы, да ещё есть возможность прицепиться и... перекочевать на другой континент!

 Отправлено: 26.06.09 10:07. Заголовок: Андрей, ошеломляюще ..

Андрей, ошеломляюще замечательная работа!
Действительно, не хватает слов...
Однозначно, такой материал требует статейного статуса.

 Отправлено: 26.06.09 12:05. Заголовок: SAE, фантастика! :s..

SAE,
фантастика!

 Отправлено: 26.06.09 12:11. Заголовок: SAE Вот это прорыв..

SAE

Вот это прорыв!!!

 Отправлено: 26.06.09 12:31. Заголовок: SAE Андрей, если на..

SAE
Андрей, если надумаете публиковать на сайте - самый зеленый свет такому шикарному материалу я гарантирую.
Даже от рыбалки на пару-тройку дней отвлекусь ради такого шедевра.

 Отправлено: 26.06.09 12:51. Заголовок: Андрей! А-бал-деть!..

Андрей!
А-бал-деть!
Обязательно "отчет"на сайте! (Что значит, "если надумаете"???), подработать -и на сайт!
Да, с таким микроскопом можно работать...

 Отправлено: 26.06.09 13:01. Заголовок: SAE 1. Жаль, что я ..

SAE
1. Жаль, что я не металловед
2. Жаль, что не могу выполнить 1 и 3 обязательные условия в связи с отсутствием 2
3. Прими восхищение твоей неиссякаемой энергией, жаль, что у меня нет сотой доли таковой.
Мне еще вот что кажется. При опубликовании на сайте(нет сомнений, спасибо Вячеславу!) нужно в каждую твою статью отсюда дать ссылки на соответствующие описания на сайте, а что еще лучше - в каждом описании иметь эти фото в полном объеме!
Андрей, ты поднимаешь сайт, мне кажется, на более высокий уровень. Спасибо!

 Отправлено: 26.06.09 13:45. Заголовок: SAE, фантастический ..

SAE, фантастический материал! Огромное спасибо Вам за Вашу работу! Надеюсь, что Вы будете продолжать работать в этом направлении с обязательным размещением материалов на сайте.

 Отправлено: 26.06.09 18:33. Заголовок: Потрясающе, просто с..

Потрясающе, просто слов нет! Целый новый мир! Огромное спасибо!

 Отправлено: 26.06.09 18:34. Заголовок: SAE Браво!! До чего..

SAE
Браво!! До чего техника дошла... Я с нашим Цейсом тихо уползаю под лавку

SAE пишет:

цитата:

Всегда задавался вопросом, что за «глазки» видны на микрофотографии сухих спор Псевдоплектании

На самом деле "глазки" - это газовые пузырьки, которые образуются при обезвоживании цитоплазмы спор (так наз. пузырьки Де Бари). При попадании спор в воду они естественным образом исчезают. А на электронных снимках видны спавшиеся (как сдувшийся мяч) из-за вакуума в котором они находятся споры.